目的 建立TNNI2突变转基因小鼠模型.方法 构建pEGFP-tnni2转基因构件,TNNI2基因的第175个氨基酸缺失,通过原核显微注射法,把线性化、纯化后的外源基因pEGFP-tnni2注射入BDF1小鼠受精卵中,胚胎移植给同期发情的假孕受体母鼠,获得子代小鼠.用PCR和Southern方法检测子代鼠尾DNA鉴定基因型.通过RT-PCR方法检测tnni2基因表达.结果 移植注射胚胎115枚给4只假孕小鼠共出生了23只后代鼠,经PCR和Southern方法检测得到4只阳性小鼠.对其子代进行RT-PCR检测,tnni2基因在肌肉、心脏内表达.结论通过显微注射法使外源基因pEGFP-tnni2 (TNNI2基因的第175个氨基酸缺失)在小鼠基因组中得到整合,建立了转pEGFP-tnni2的转基因小鼠模型.
作者:杨葳;郑志红;姜淼;李兆阳;王惟;王禄增
来源:中国比较医学杂志 2008 年 18卷 7期