目的：建立大鼠椎间盘髓核细胞体外凋亡模型。方法为了充分模拟退变椎间盘内营养缺乏的微环境，本实验分别采用含1％，3％，5％，8％，10％胎牛血清的DMEM培养基培养椎间盘髓核细胞，筛选最佳促凋亡浓度，分别检测髓核细胞凋亡率、凋亡相关蛋白Bax、bcl－2、caspase－3酶的表达、细胞增殖曲线及免疫荧光分析。结果流式细胞仪测得髓核细胞凋亡率随着胎牛血清（ FBS）浓度降低而升高，3％FBS为最有效诱导凋亡浓度；Western blot示Bax、caspase－3酶表达在3％FBS组明显高于10％FBS组，同时bcl－2表达下降；CCK－8检测结果显示含3％FBS的培养基内，随着凋亡率的增长，髓核细胞增殖的速率越来越慢；免疫荧光分析3％FBS组FAS表达量明显比10％FBS组增高。结论3％FBS能诱导髓核细胞发生凋亡，最终会导致细胞功能丧失，caspase家族参与并执行了这一过程。
作者：王厚磊；卢伟；李德芳；丁磊；吴靖平
来源：中国实验动物学报 2015 年 6期
