人IL-37b基因真核表达载体的构建与表达-临床诊疗知识库

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作者：

姚静；程江；裴雪枫；王静宇；袁明

来源：

中国实验动物学报 2016 年 24卷 3期

标签：

白细胞介素-37 基因克隆真核表达载体 THP-1细胞 Interlukin-37 Gene cloning Eukaryotic expression vector THP-1 cells

目的：构建pEGFP-N1／IL-37b真核表达载体，并检测其在THP-1细胞中的表达情况。方法从人PBMCs中提取总RNA，利用RT-qPCR技术扩增出IL-37b基因编码区序列，克隆至pEGFP-N1真核表达载体，将构建的重组质粒pEGFP-N1／IL-37b转染到THP-1细胞中，通过RT-qPCR和Western blot检测IL-37的表达。结果双酶切及基因测序结果显示IL-37b基因正确插入真核表达载体pEGFP-N1中；RT-qPCR和Western blot结果显示转染THP-1细胞后，IL-37表达水平明显升高（P＜0.01）。结论成功构建了新型抗炎因子IL-37真核表达载体pEG-FP-N1／IL-37b，为进一步研究IL-37功能及与相关疾病的关系奠定基础。

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