目的:构建 hi FGF2( high molecular weight isoform fi-broblast growth factor-2,hi FGF2)真核表达载体,并观察其过表达后对细胞凋亡的影响。方法设计合成hi FGF2 cDNA模板引物,Nhel和Hind III双酶切pDsRed1-N1质粒,T4 DNA连接酶重组hi FGF2质粒,PCR扩增目的基因,琼脂糖凝胶电泳检测及测序鉴定。将重组 hi FGF2质粒瞬时转染HEK293细胞,荧光倒置显微镜检测转染效率。 Annexin V-FITC/PI 双染法流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 hi FGF2真核表达载体符合设计要求,瞬时转染HEK293细胞的转染率达70
作者:陈钟琳;姜红岩;洪晓冰;陈中华;郑燕珊;徐涵;石刚刚;黄展勤
来源:中国药理学通报 2014 年 11期