目的：构建含小分子肽P1-GFP融合基因慢病毒载体，用携带P1-GFP融合基因的慢病毒感染MSC，使MSC具有靶向性，将靶向MSC注入小鼠体内后观察MSC在小鼠脾脏的定位及与淋巴细胞的关系。方法用组织片贴壁法培养健康人脐带间充质干细胞，用基因工程技术构建含小分子肽P1-GFP融合基因慢病毒载体并感染人脐带间充质干细胞，通过尾静脉将转入P1-GFP融合基因的MSC注入小鼠体内，18 h后免疫组化染色观察GFP在小鼠脾脏的定位。结果培养的健康人脐带间充质干细胞生长良好， MSC感染含P1-GFP融合基因的慢病毒18 h后MSC开始出现绿色荧光，随着培养时间的延长，荧光强度逐渐增强，72 h达高峰。靶向MSC表达髓系干细胞的表面标记CD105（90.0％）／CD44（98％），CD73（85.0％）／CD90（98.5％）。将靶向MSC经尾静脉注入小鼠体内，18 h后小鼠脾脏出现大量GFP阳性细胞，并与脾脏淋巴细胞密切接触。结论本研究成功构建了含P1-GFP融合基因的靶向MSC，靶向MSC成功定向脾脏，并与脾脏淋巴细胞密切接触，可用于后续的实验研究。
作者：秦力维；张宁坤；路平；彭秀军；王桂琴；高原；曹利群；崔蓓；郭建巍
来源：中国比较医学杂志 2015 年 6期
