目的 在细胞水平筛选狨猴B2m基因的有效沉默靶点,并进行验证.方法 查询人源B2m验证过的有效siRNA靶位点序列,与狨猴B2m基因序列进行同源性比较,选择匹配靶点合成shRNA序列.将体外合成的2条干扰序列分别与慢病毒载体 FUGW-TDT连接,构建FUGW-TDT-shb2m干扰表达质粒,在聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)介导下转染293T细胞,转染后48h,用实时荧光定量法检测转染细胞中B2m基因mRNA的水平.结果 筛选出2个与狨猴完全同源的B2m沉默靶位点,分别位于B2m mRNA 的290~310 bp,665~685 bp;B2m两个靶点在转录水平的沉默效率分别为(46.54±7.91)
作者：邓怡晨；张晨；向志光；滕永康；刘云波
来源：中国比较医学杂志 2017 年 27卷 5期
