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目的 采用氧糖剥夺(OGD)致HUVEC细胞损伤模型,考察三七总皂苷(PNS)及其单体 Rg1、Rb1对氧糖剥夺致血管内皮紧密连接损伤的保护作用.方法 HUVEC细胞接种于Transwell细胞小室,待细胞融合后,设立实验组别:正常对照组、模型组、PNS 10、20、40 mg/L组以及 Rb113.52 mg/L、Rg112.44 mg/L组,于缺氧同时进行药物干预,氧糖剥夺6 h复氧24 h后,检测HUVEC内皮细胞电阻值以及内皮渗透性的变化;采用激光共聚焦显微镜,免疫荧光法检测 HUVEC细胞 ZO-1、claudin-5蛋白表达的变化.结果 与正常对照组相比,HUVEC细胞缺氧6 h复氧24 h后内皮细胞间紧密连接电阻显著降低,细胞渗透性显著升高(P< 0.05).PNS 20、40 mg/L组能够显著抑制模型组紧密连接电阻的降低,抑制HUVEC细胞渗透性的升高(P< 0.05).人参皂苷Rb1能够显著升高OGD 6 h复氧24 h后内皮紧密连接电阻,降低HUVEC细胞渗透性(P< 0.05).免疫荧光检测结果显示,正常对照组HUVEC 细胞的ZO-1及claudin-5蛋白主要分布于细胞膜周围,排列连续,显示出内皮细胞的典型铺路石排列.缺氧6 h复氧24 h损伤后,模型组细胞边缘的紧密连接蛋白显著减少,环形结构断裂,甚至消失,细胞核内紧密连接蛋白呈增加趋势.PNS 20、40 mg/L及Rb113.52 mg/L可观察到细胞间紧密连接局部恢复,呈铺路石样结构.结论

作者:杨爱玲;武汀;张天睿;韩冰;孙建宁;张硕峰

来源:中国比较医学杂志 2018 年 28卷 2期

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作者:
杨爱玲;武汀;张天睿;韩冰;孙建宁;张硕峰
来源:
中国比较医学杂志 2018 年 28卷 2期
标签:
血栓通胶囊 PNS HUVEC细胞 紧密连接 xueshuantong XST panax notoginseng saponins PNS human umbilical vein endothelial cells HUVEC cells tight junction oxygen-glucose deprivation/reoxygenation(OGD/Reox)
目的 采用氧糖剥夺(OGD)致HUVEC细胞损伤模型,考察三七总皂苷(PNS)及其单体 Rg1、Rb1对氧糖剥夺致血管内皮紧密连接损伤的保护作用.方法 HUVEC细胞接种于Transwell细胞小室,待细胞融合后,设立实验组别:正常对照组、模型组、PNS 10、20、40 mg/L组以及 Rb113.52 mg/L、Rg112.44 mg/L组,于缺氧同时进行药物干预,氧糖剥夺6 h复氧24 h后,检测HUVEC内皮细胞电阻值以及内皮渗透性的变化;采用激光共聚焦显微镜,免疫荧光法检测 HUVEC细胞 ZO-1、claudin-5蛋白表达的变化.结果 与正常对照组相比,HUVEC细胞缺氧6 h复氧24 h后内皮细胞间紧密连接电阻显著降低,细胞渗透性显著升高(P< 0.05).PNS 20、40 mg/L组能够显著抑制模型组紧密连接电阻的降低,抑制HUVEC细胞渗透性的升高(P< 0.05).人参皂苷Rb1能够显著升高OGD 6 h复氧24 h后内皮紧密连接电阻,降低HUVEC细胞渗透性(P< 0.05).免疫荧光检测结果显示,正常对照组HUVEC 细胞的ZO-1及claudin-5蛋白主要分布于细胞膜周围,排列连续,显示出内皮细胞的典型铺路石排列.缺氧6 h复氧24 h损伤后,模型组细胞边缘的紧密连接蛋白显著减少,环形结构断裂,甚至消失,细胞核内紧密连接蛋白呈增加趋势.PNS 20、40 mg/L及Rb113.52 mg/L可观察到细胞间紧密连接局部恢复,呈铺路石样结构.结论