ID4基因启动子区甲基化发生率在急性白血病中极高,甲基化程度与急性白血病关系密切.因缺少合适的研究方法,其具体的甲基化量化水平与疾病的关系,人们一直缺乏认识.本研究旨在建立ID4甲基化定量PCR体系,同时验证该方法的特异性及敏感性,并初步尝试在初治急性白血病骨髓样本中评估ID4的甲基化水平.首先构建质粒并建立体系标准曲线,分别使用MSP和定量MSP对细胞系样本进行检测,以传统MSP的结果为对照,验证新方法的特异性;按不同比例将甲基化阴性和阳性细胞混合,用甲基化定量PCR扩增验证新方法敏感性.结果表明,本研究成功建立了符合绝对定量要求的标准曲线;通过细胞系验证,MSP结果与定量MSP结果完全一致;同时在甲基化阴性细胞背景下,定量MSP可以稳定的检测到1∶10-5水平的1D4甲基化阳性细胞.在急性白血病骨髓样本检测中,定量MSP甲基化阳性检出率高于MSP.结论:本研究成功建立了完整的ID4基因甲基化定量PCR体系,该方法特异性好、敏感性高.
作者：刘洋；康慧媛；王莉莉；卢学春；朱宏丽；于力
来源：中国实验血液学杂志 2014 年 22卷 2期
