目的:研究LIF联合bFGF对人脐带间充质干细胞hUC-MSC增殖、干性维持及衰老的影响.方法:实验分为4组:对照组,加入完全培养基(含10％ FBS的α-MEM)常规培养;LIF组,加入含10 ng/ml LIF的完全培养液;bFGF组,加入含10 ng/ml bFGF的完全培养液;联合组,加入含10 ng/ml LIF和10 ng/ml bFGF的完全培养液.采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)测定各组第4代hUC-MSC生长曲线;在倒置相差显微镜下观察各组hUC-MSC形态变化;β-半乳糖苷酶染色检测各组细胞衰老情况;RT-PCR检测表达情况.结果:4组细胞生长曲线均近似S形,细胞增殖速率表现为联合组＞ bFGF组＞LIF组＞对照组.对照组细胞较早出现衰老,增殖减慢;LIF组细胞早期形态维持较好,但增殖相对缓慢,后期大部分细胞衰老;bFGF组部分细胞呈衰老改变,但增殖较快;联合组细胞增殖迅速,能长期维持hUC-MSC形态特征,仅有少量衰老细胞.RT-PCR显示,LIF和bFGF均能上调PCNA、OCT4、NANOG,下调P16、P21、P53的表达,其联合作用效果更明显.结论:LIF联合bFGF不仅可以促进hUC-MSC增殖,维持其干性,而且能够延缓hUC-MSC的衰老.
作者：胡文龙；吴平平；殷嫦嫦；施剑明；殷明
来源：中国实验血液学杂志 2016 年 24卷 1期
