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目的:研究microRNA-20a (miR-20a)对小鼠C3H/10T1/2细胞成骨分化作用的影响及其调控机制.方法:对贴壁培养的小鼠C3H/10T1/2细胞成骨诱导不同时间,ALP染色及应用qRT-PCR验证其诱导结果,同时观察MiR-20a在诱导过程中表达变化;细胞转染MiR-20a mimics,CKIP-1 siRNA,在荧光显微镜下观察转染效果,应用qRT-PCR测定过表达及干扰效率;qRT-PCR检测过表达MiR-20a及干扰CKIP-1对细胞成骨分化的影响及过表达MiR-20a对CKIP-1基因表达的影响.结果:成骨标记基因ALP、OSX、OCN、BSP随小鼠C3H/10T1/2细胞诱导过程逐渐升高,且成骨诱导分化过程中MiR-20a表达上调.过表达MiR-20a促进C3H/10T1/2细胞成骨分化,成骨标记基因碱性磷酸酶(ALP)、RUNX2、OSX、OCN、BSP显著高于对照组,并且抑制CKI P-1的表达;干扰CKIP-1能促进细胞成骨标记基因表达.结论:MiR-20a可能通过下调骨形成负调节因子CKIP-1的表达促进C3H/10T1/2细胞成骨分化.

作者:陈俊凤;杨燕美;董溪溪;董晓惠;王玉涵;黄小会;江小霞;曹均凯

来源:中国实验血液学杂志 2017 年 25卷 1期

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作者:
陈俊凤;杨燕美;董溪溪;董晓惠;王玉涵;黄小会;江小霞;曹均凯
来源:
中国实验血液学杂志 2017 年 25卷 1期
标签:
MiR-20a CKIP-1 C3H/10T1/2 成骨分化 miR-20a CKIP-1 C3H/10T1/2 osteogenic differentiation
目的:研究microRNA-20a (miR-20a)对小鼠C3H/10T1/2细胞成骨分化作用的影响及其调控机制.方法:对贴壁培养的小鼠C3H/10T1/2细胞成骨诱导不同时间,ALP染色及应用qRT-PCR验证其诱导结果,同时观察MiR-20a在诱导过程中表达变化;细胞转染MiR-20a mimics,CKIP-1 siRNA,在荧光显微镜下观察转染效果,应用qRT-PCR测定过表达及干扰效率;qRT-PCR检测过表达MiR-20a及干扰CKIP-1对细胞成骨分化的影响及过表达MiR-20a对CKIP-1基因表达的影响.结果:成骨标记基因ALP、OSX、OCN、BSP随小鼠C3H/10T1/2细胞诱导过程逐渐升高,且成骨诱导分化过程中MiR-20a表达上调.过表达MiR-20a促进C3H/10T1/2细胞成骨分化,成骨标记基因碱性磷酸酶(ALP)、RUNX2、OSX、OCN、BSP显著高于对照组,并且抑制CKI P-1的表达;干扰CKIP-1能促进细胞成骨标记基因表达.结论:MiR-20a可能通过下调骨形成负调节因子CKIP-1的表达促进C3H/10T1/2细胞成骨分化.