目的 实现Survivin蛋白在大肠杆菌BL21中的可溶性表达,建立基于Survivin蛋白的Survivin抗体检测方法,为survivin的深入研究及肿瘤的早期诊断奠定基础.方法 从食管癌细胞Eca109中提取RNA,经RT-PCR扩增,克隆出Survivin基因;用PCR将Survivin克隆至载体pET32a(+);用双酶切和DNA测序技术对构建的载体进行鉴定;IPTG诱导Survivin蛋白表达,用镍离子亲和层析纯化,ELISA及Western blot鉴定;建立基于重组融合蛋白的Survivin抗体检测方法,并对肿瘤和癌前病变患者血清进行检测.结果 构建了Survivin蛋白原核表达载体pET32a(+)/Survivin/BL21,实现了Survivin蛋白在大肠杆菌BL21中的可溶性表达;建立了检测Survivin特异性抗体的间接ELISA,对44份健康血清、142份肿瘤患者血清、186份癌前病变患者血清进行了检测,结果显示:anti-Survivin在肿瘤患者中的检出率为32
作者：郭建巍；王小平；马骢；王珍光；蒋学兵；刘敏
来源：中国实验诊断学 2007 年 11卷 12期
