目的 构建Sialoprotein associated with cones and rods (SPACR) 原核表达载体并高效表达.方法 根据基因文库中SPACR基因的cDNA序列设计引物,采用PCR方法扩增SPACR cDNA片段,并克隆进原核表达载体pGEX-6P-1中,转化于大肠杆菌BL21,测序鉴定后,用IPTG诱导表达出目的 蛋白,经谷胱甘肽琼脂糖柱柱层析纯化,收获表达产物进行SDS-PAGE电泳分析和Western blot鉴定.结果 PCR后扩增得到的目的 片段,经酶切鉴定及DNA序列测定,证实重组载体pGEX-6P-1-SPACR构建正确,表达蛋白分子量约为分别为21.2、22.6、36.2及20.8kDa.结论 在大肠杆菌中获得了SPACR片段的高效表达,为研究其蛋白功能奠定了基础.
作者：赵劲松；黄岚峰；王淑荣
来源：中国实验诊断学 2011 年 15卷 8期
