目的研究腺病毒介导的血管内皮细胞生长因子受体(KDR)启动子驱动 CD/TK双自杀基因系统对血管内皮细胞及结直肠癌肿瘤细胞的选择性杀伤作用.方法质粒 pAdEasy-KDR-CDglyTK和 pAdEasy-CMV-CDglyTK在 293细胞中包装、扩增后 ,体外感染表达 KDR的 ECV304、 SW620细胞株和不表达 KDR的 LS174T细胞株 ,观察其感染效率并以 RT-PCR方法检测转基因细胞 CDglyTK的表达,然后给予不同浓度的前药 5-氟胞嘧啶(5-FC)及更昔洛韦 (GCV)处理,观察该体系对不同细胞株的杀伤效应及其旁观者效应.结果两种病毒滴度均为 2.0× 1012 pfu/ml.两种重组体对各细胞株的感染率相似,其感染率随腺病毒滴度的增高而递增. RT-PCR方法检测发现:除感染 AdKDR-CDglyTK的 LS174T细胞外,感染 AdCMV-CDglyTK的所有细胞及感染 AdKDR-CDglyTK的其他两种细胞均有目的基因 CDglyTK的表达.该体系治疗结果提示: (1)感染 AdCMV-CDglyTK的所有细胞株和感染 AdKDR-CDglyTK的 ECV304、 SW620细胞对前药具有较高的敏感性 ,且其敏感性差异无显著性意义(均 P >0.05),与前两者相比感染 AdKDR-CDglyTK的 LS174T细胞对前药不敏感(均 P< 0.001); (2)双自杀基因的疗效优于任一单自杀基因的疗效(均 P< 0.001); (3)该体系旁观者效应明显.结论 KDR基因启动子可调控双自

作者：黄宗海；苏国强；杨祖立；俞金龙；厉周；范应方；宋慧娟

来源：中华胃肠外科杂志 2005 年 8卷 2期