目的 探讨靶向β-catenin的shRNA对结肠癌细胞Colo205的WNT通路的阻断和该基因沉默效应对结肠癌细胞在体外的生长抑制作用.方法 构建靶向β-catenin的shRNA载体质粒和阴性对照载体,然后分别转染入结肠癌细胞Colo205.用RT-PCR和Western印迹法检测β-catenin的mRNA和蛋白的表达情况,细胞免疫荧光染色法检测β-catenin蛋白的表达.噻唑蓝实验评价转染后各组细胞的体外增殖情况.软琼脂集落形成实验检测各组细胞的非锚着依赖性生长的能力.结果 成功构建了靶向β-catenin的shRNA和阴性对照质粒载体.特异性靶向β-catenin的shRNA能够明显下调β-catenin mRNA,并抑制β-catenin蛋白的表达,其抑制率分别为47.89
作者:黄文生;彭慧;谭敏;马晋平;汪建平;兰平
来源:中华胃肠外科杂志 2009 年 12卷 3期