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目的:建立一种改良的高效液相色谱法测定人红细胞中巯基嘌呤甲基转移酶(thiopurine methyltransferase, TPMT)的活性.方法:采用反相高效液相色谱法直接测定酶促反应的产物6-甲基巯基嘌呤的浓度,从而计算红细胞中TPMT的活性.以6-巯基嘌呤为底物,S-腺苷-L-甲硫氨酸作为甲基供体,红细胞裂解液在一定的条件下进行孵化,然后经乙酸乙酯萃取处理后,用HPLC分析.色谱柱为hypersil BDS C18,流动相为水-甲醇-三乙胺(磷酸调至pH 3.5)(76.8∶23∶0.2),紫外检测波长为 290 nm.结果:6-甲基巯基嘌呤在 10~200 μg/L 范围内呈良好的线性关系,相关系数r=0.9994,[JP2]最低检测限为 3 μg/L(S/N=3),平均回收率为 86

作者:吴珏珩;黄民;张建萍;吴燕飞;汤丽芬;张选红

来源:中国卫生检验杂志 2005 年 15卷 8期

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作者:
吴珏珩;黄民;张建萍;吴燕飞;汤丽芬;张选红
来源:
中国卫生检验杂志 2005 年 15卷 8期
标签:
反相高效液相色谱法 巯基嘌呤甲基转移酶 6-巯基嘌呤 6-甲基巯基嘌呤 红细胞裂解液
目的:建立一种改良的高效液相色谱法测定人红细胞中巯基嘌呤甲基转移酶(thiopurine methyltransferase, TPMT)的活性.方法:采用反相高效液相色谱法直接测定酶促反应的产物6-甲基巯基嘌呤的浓度,从而计算红细胞中TPMT的活性.以6-巯基嘌呤为底物,S-腺苷-L-甲硫氨酸作为甲基供体,红细胞裂解液在一定的条件下进行孵化,然后经乙酸乙酯萃取处理后,用HPLC分析.色谱柱为hypersil BDS C18,流动相为水-甲醇-三乙胺(磷酸调至pH 3.5)(76.8∶23∶0.2),紫外检测波长为 290 nm.结果:6-甲基巯基嘌呤在 10~200 μg/L 范围内呈良好的线性关系,相关系数r=0.9994,[JP2]最低检测限为 3 μg/L(S/N=3),平均回收率为 86