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目的 建立一种快速检测胞内分枝杆菌活力的方法 .方法 将一定量培养至对数生长期的含pMVeis的重组耻垢分枝杆菌感染U937巨噬细胞,以含空质粒的耻垢分枝杆菌为对照,吞噬作用2h后洗去胞外细菌,再分别培养4、12、24和48 h后收集细胞并裂解之.获得的胞内细菌用FDA荧光染料染色后用流式细胞仪检测死亡率,并与平板菌落计数法进行比较.结果 流式细胞仪检测出感染12 h后重组耻垢分枝杆菌胞内死亡率较对照组均有显著下降(P<0.05),流式细胞仪检测法与平板菌落计数法相比差异无统计学意义(P>0.05).结论 流式细胞术与传统的平板计数法相比具有快速、敏感、方便的特点,可用于分枝杆菌活菌快速检测.

作者:何子纯;李升锦

来源:中国微生态学杂志 2011 年 23卷 8期

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作者:
何子纯;李升锦
来源:
中国微生态学杂志 2011 年 23卷 8期
标签:
重组耻垢分枝杆菌 eis基因 流式细胞仪 平板菌落计数法 乙酰乙酸荧光素
目的 建立一种快速检测胞内分枝杆菌活力的方法 .方法 将一定量培养至对数生长期的含pMVeis的重组耻垢分枝杆菌感染U937巨噬细胞,以含空质粒的耻垢分枝杆菌为对照,吞噬作用2h后洗去胞外细菌,再分别培养4、12、24和48 h后收集细胞并裂解之.获得的胞内细菌用FDA荧光染料染色后用流式细胞仪检测死亡率,并与平板菌落计数法进行比较.结果 流式细胞仪检测出感染12 h后重组耻垢分枝杆菌胞内死亡率较对照组均有显著下降(P<0.05),流式细胞仪检测法与平板菌落计数法相比差异无统计学意义(P>0.05).结论 流式细胞术与传统的平板计数法相比具有快速、敏感、方便的特点,可用于分枝杆菌活菌快速检测.