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目的 探讨Notch信号在大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向内皮细胞分化中的作用及其对诱导分化后细胞功能的影响.方法 分离、培养大鼠MSCs,用含血管内皮生长因子(VEGF165)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的细胞培养液培养大鼠MSCs 2周,诱导MSCs向内皮细胞分化;采用免疫荧光技术鉴定细胞;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测诱导分化前后细胞上Notch信号受体和配体的表达.用γ-内分泌酶抑制剂阻断细胞Notch信号通路的转导,应用划痕实验检测细胞迁移能力;将细胞接种在半固体培养基上,观察其形成毛细血管样结构的能力.结果 诱导MSCs向内皮细胞分化后细胞表达CD31和Flk1,说明其具备内皮细胞的特性.MSCs上表达有Notch信号的受体Notchl和配体Jaggedl的mRNA;但诱导前后细胞上Notch信号受体Notchl mRNA表达差异无统计学意义(0.59±0.01比0.59±0.01,P>0.05),其配体Jaggedl mRNA表达稍有上升趋势(1.01±0.02比0.99±0.03,P>0.05).阻断Notch信号通路转导可增强诱导后内皮细胞的迁移能力[划痕空白处细胞数(个):44.61±4.34比40.06±2.43,P<0.053及形成毛细血管样结构的能力(细胞分级:3.67±0.82比2.00±0.89,P<0.01).结论 Notch信号在大鼠MSCs向内皮细胞分化过程中可能具有重要作用,阻断Notch信号通路转导可增强诱导后内皮

作者:晋金兰;庄汉屏;韦建瑞;冯志顺;邓哲彤;张敏

来源:中国危重病急救医学 2011 年 23卷 6期

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作者:
晋金兰;庄汉屏;韦建瑞;冯志顺;邓哲彤;张敏
来源:
中国危重病急救医学 2011 年 23卷 6期
标签:
Notch信号通路 骨髓间充质干细胞 内皮细胞 Notch pathway Bone marrow mesenchymal stem cell Endothelial cell
目的 探讨Notch信号在大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向内皮细胞分化中的作用及其对诱导分化后细胞功能的影响.方法 分离、培养大鼠MSCs,用含血管内皮生长因子(VEGF165)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的细胞培养液培养大鼠MSCs 2周,诱导MSCs向内皮细胞分化;采用免疫荧光技术鉴定细胞;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测诱导分化前后细胞上Notch信号受体和配体的表达.用γ-内分泌酶抑制剂阻断细胞Notch信号通路的转导,应用划痕实验检测细胞迁移能力;将细胞接种在半固体培养基上,观察其形成毛细血管样结构的能力.结果 诱导MSCs向内皮细胞分化后细胞表达CD31和Flk1,说明其具备内皮细胞的特性.MSCs上表达有Notch信号的受体Notchl和配体Jaggedl的mRNA;但诱导前后细胞上Notch信号受体Notchl mRNA表达差异无统计学意义(0.59±0.01比0.59±0.01,P>0.05),其配体Jaggedl mRNA表达稍有上升趋势(1.01±0.02比0.99±0.03,P>0.05).阻断Notch信号通路转导可增强诱导后内皮细胞的迁移能力[划痕空白处细胞数(个):44.61±4.34比40.06±2.43,P<0.053及形成毛细血管样结构的能力(细胞分级:3.67±0.82比2.00±0.89,P<0.01).结论 Notch信号在大鼠MSCs向内皮细胞分化过程中可能具有重要作用,阻断Notch信号通路转导可增强诱导后内皮