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目的 观察Ⅵ因子活化蛋白酶(FSAP)对肺纤维母细胞增殖和胶原合成的影响.方法 体外培养人肺纤维母细胞(HPF),分别加入含肝素10 mg/L、血小板源性生长因子-BB (PDGF-BB) 20 ug/L、FSAP12 mg/L和抑肽酶10 mg/L的混合液,用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrDU)摄入法测定细胞增殖情况;用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)分别检测细胞胶原Ⅲ的mRNA和蛋白表达;用Western blotting法检测细胞p42/p44丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)的磷酸化.结果 与空白对照组比较,PDGF-BB能刺激HPF的增殖和胶原Ⅲ合成(细胞增殖:无肝素1.23±0.06比1.01±0.01,加肝素1.24±0.04比0.98±0.01;胶原Ⅲ mRNA表达:无抑肽酶1.79±0.02比1.00±0.00,加抑肽酶1.57±0.01比1.00±0.00;胶原Ⅲ蛋白表达:无抑肽酶0.54±0.26比0.17±0.05,加抑肽酶0.59±0.31比0.24±0.15,均P<0.05),并使磷酸化p42/p44 MAPK表达增加(无抑肽酶0.89±0.24比0.51±0.17,加抑肽酶0.97±0.41比0.37±0.05,均P<0.05).FSAP加用肝素后可明显抑制PDGF-BB引起的细胞增殖(0.92±0.23比1.19±0.11,P<0.05);当PDGF-BB与FSAP和肝素共同作用时,与单用PDGF-BB比较,FSAP对HPF胶原Ⅲ的合成、p42/p44 MAPK磷酸化具有抑制作用(胶原Ⅲ mRNA表达:0.61±0.02比1.79

作者:穆恩;陈松;李鑫;马晓春

来源:中国危重病急救医学 2011 年 23卷 11期

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穆恩;陈松;李鑫;马晓春
来源:
中国危重病急救医学 2011 年 23卷 11期
标签:
Ⅶ因子活化蛋白酶 血小板源性生长因子-BB 肺纤维母细胞 胶原 Factor Ⅵ-activating protease Platelet-derived growth factor-BB Pulmonaryfibroblast Collagen
目的 观察Ⅵ因子活化蛋白酶(FSAP)对肺纤维母细胞增殖和胶原合成的影响.方法 体外培养人肺纤维母细胞(HPF),分别加入含肝素10 mg/L、血小板源性生长因子-BB (PDGF-BB) 20 ug/L、FSAP12 mg/L和抑肽酶10 mg/L的混合液,用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrDU)摄入法测定细胞增殖情况;用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)分别检测细胞胶原Ⅲ的mRNA和蛋白表达;用Western blotting法检测细胞p42/p44丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)的磷酸化.结果 与空白对照组比较,PDGF-BB能刺激HPF的增殖和胶原Ⅲ合成(细胞增殖:无肝素1.23±0.06比1.01±0.01,加肝素1.24±0.04比0.98±0.01;胶原Ⅲ mRNA表达:无抑肽酶1.79±0.02比1.00±0.00,加抑肽酶1.57±0.01比1.00±0.00;胶原Ⅲ蛋白表达:无抑肽酶0.54±0.26比0.17±0.05,加抑肽酶0.59±0.31比0.24±0.15,均P<0.05),并使磷酸化p42/p44 MAPK表达增加(无抑肽酶0.89±0.24比0.51±0.17,加抑肽酶0.97±0.41比0.37±0.05,均P<0.05).FSAP加用肝素后可明显抑制PDGF-BB引起的细胞增殖(0.92±0.23比1.19±0.11,P<0.05);当PDGF-BB与FSAP和肝素共同作用时,与单用PDGF-BB比较,FSAP对HPF胶原Ⅲ的合成、p42/p44 MAPK磷酸化具有抑制作用(胶原Ⅲ mRNA表达:0.61±0.02比1.79