目的 探讨高糖对脂多糖(LPS)刺激下血管内皮细胞损伤的影响及其机制.方法 将人肺脏微血管内皮细胞(PMVEC)分为正常糖组(NG组)、正常糖+LPS刺激组(NGL组)、高糖组(HG组)、高糖+LPS刺激组(HGL组),分别给予含10％小牛血清的正常糖(5.5 mmol/L)或高糖(33 mmol/L)培养5d,加入10 mg/L LPS刺激细胞24h.采用免疫荧光染色观察细胞纤维肌动蛋白(F-actin)的分布及变化；扫描电镜观察细胞膜窗孔数量及孔径变化；细胞迁移实验(Transwell)测定单层内皮细胞的辣根过氧化物酶(HRP)通透性；硝酸盐还原法(Griess法)检测细胞培养上清液中一氧化氮(NO)含量；蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)测定细胞二甲基精氨酸-二甲胺水解酶2(DDAH2)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的蛋白表达.结果 与NGL组比较,HGL组PMVEC的F-actin分布排列紊乱,细胞膜窗孔异常增大、增多,细胞单层对HRP通透率增加[(53.62±6.70)％比(23.63±3.92)％,P＜0.01],细胞DDAH2表达(积分A值)减少(0.33±0.08比0.77±0.14,P＜0.01),iNOS表达(积分A值)增加(1.40±0.29比1.04±0.09,P＜0.01),eNOS表达(积分A值)减少(0.67±0.09比0.91±0.17,P＜0.05),上清液NO含量(μmol/L)增多(20.36±2.25比7.99±0.33,P＜0.01).结论 高糖加重LPS刺激下

作者：刘秀娟；穆恩；梁英健；章志丹；马晓春

来源：中国危重病急救医学 2013 年 25卷 3期