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目的 探讨亚低温对脂多糖(LPS)刺激下巨噬细胞Toll样受体4(TLR4)mRNA转录及下游炎症平衡的影响.方法 实验用RAW264.7小鼠巨噬细胞株,将细胞分别置于37 ℃和32℃的温育箱中培养,干预组加入10 ng/mL LPS进行刺激,对照组加入等量生理盐水.分别于培养2、8、24h取细胞上清液检测白细胞介素(IL-1β、IL-10)水平;用TRIzol提取细胞总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TLR4 mRNA的转录水平.结果 LPS刺激下,常温组和亚低温组TLR4 mRNA表达水平均呈先升高、后降低的趋势(均P< 0.001);同一时间点,亚低温组TLR4 mRNA表达水平(2-AAC)均明显低于常温组(2 h:9.19 ±0.57比10.08±1.02,t=-2.285,P=0.036;8 h:13.58±1.57比15.24±1.63,t=-2.201,P=0.042;24 h:6.85±1.17比8.17±1.21,t=2.353,P=0.032).LPS刺激下,常温组和亚低温组随时间延长IL-1β、IL-10均逐步增高(均P<0.001);同一时间点,亚低温组IL-1β(ng/L)明显低于常温组(2 h:87.08±29.35比110.53±26.58,t=1.777,P=0.047;8 h:119.19±49.14比173.25±37.21,t=2.631,P=0.018;24 h:208.66±53.83比346.56±64.30,f =4.933,P<0.001);IL-10(ng/L)明显高于常温组(8 h:170.01±24.90比140.02±15.08,t=-3.091,P=0.007;24 h:423.10±52.40比165.06±31.97,t=-12.611

作者:汪首振;汤展宏;胡军涛;蒋良艳;尹祥

来源:中华危重病急救医学 2014 年 26卷 2期

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作者:
汪首振;汤展宏;胡军涛;蒋良艳;尹祥
来源:
中华危重病急救医学 2014 年 26卷 2期
标签:
亚低温 脂多糖 巨噬细胞 Toll样受体4 Hypothermia Lipopolysaccharide Macrophage Toll-like receptor 4
目的 探讨亚低温对脂多糖(LPS)刺激下巨噬细胞Toll样受体4(TLR4)mRNA转录及下游炎症平衡的影响.方法 实验用RAW264.7小鼠巨噬细胞株,将细胞分别置于37 ℃和32℃的温育箱中培养,干预组加入10 ng/mL LPS进行刺激,对照组加入等量生理盐水.分别于培养2、8、24h取细胞上清液检测白细胞介素(IL-1β、IL-10)水平;用TRIzol提取细胞总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TLR4 mRNA的转录水平.结果 LPS刺激下,常温组和亚低温组TLR4 mRNA表达水平均呈先升高、后降低的趋势(均P< 0.001);同一时间点,亚低温组TLR4 mRNA表达水平(2-AAC)均明显低于常温组(2 h:9.19 ±0.57比10.08±1.02,t=-2.285,P=0.036;8 h:13.58±1.57比15.24±1.63,t=-2.201,P=0.042;24 h:6.85±1.17比8.17±1.21,t=2.353,P=0.032).LPS刺激下,常温组和亚低温组随时间延长IL-1β、IL-10均逐步增高(均P<0.001);同一时间点,亚低温组IL-1β(ng/L)明显低于常温组(2 h:87.08±29.35比110.53±26.58,t=1.777,P=0.047;8 h:119.19±49.14比173.25±37.21,t=2.631,P=0.018;24 h:208.66±53.83比346.56±64.30,f =4.933,P<0.001);IL-10(ng/L)明显高于常温组(8 h:170.01±24.90比140.02±15.08,t=-3.091,P=0.007;24 h:423.10±52.40比165.06±31.97,t=-12.611