目的:探讨脂多糖( lipopolysaccharide , LPS)对血小板凋亡的诱导作用及血小板Toll样受体4(Toll-like receptor 4, TLR4)在LPS诱导的血小板凋亡中的作用。方法取健康志愿者的新鲜静脉血,分离富含血小板血浆,制备洗涤血小板,随机分为对照组( C组)、LPS组( L组)、TLR4单克隆抗体( TLR4 monoclonal antibody , TLR4mAb)预处理组( P组)及凝血酶组( T组)4组。各组均加入FcγRⅡ单克隆抗体封闭20 min;P组预先加入TLR4mAb,其余各组加入等量MTB缓冲液,室温孵育30 min;随后,L组及P组均加入LPS,T组加入凝血酶,C组加入等量的MTB,各组于室温下孵育30 min;裂解液裂解血小板,提取血小板蛋白,凋亡因子抗体芯片法检测各组凋亡相关蛋白的表达水平。采用芯片分析软件进行数据分析。结果人血小板可以表达多种凋亡相关蛋白。与C组比较,L组显示36种血小板凋亡相关蛋白的表达升高( fold change >1畅50),包括促凋亡蛋白16种,抗凋亡蛋白8种,双向调控蛋白12种;与C组比较,T组可以诱导29种凋亡相关蛋白表达增高(fold change>1.50),其中促凋亡蛋白15种,抗凋亡蛋白6种及双向调控蛋白8种;与L组比较,P组凋亡相关蛋白中有29种表达下调(fold change<0.67),但与C组比较,仍有17种凋
作者:王淑娟;王兵;姚芳超;吉祥;王玉亮;王勇强
来源:中国急救医学 2014 年 12期