目的:探讨转化生长因子-β(TGF-β)/Smad信号通路对急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)平衡的影响及机制。方法按随机数字表法将60只雄性C57BL/6小鼠分为3组,每组20只。白细胞介素-17(IL-17)预处理组先经腹腔注射抗小鼠IL-17单克隆抗体200μg,ALI模型组则注射200μg同型对照抗体IgG2a;24h后两组均经气管内注入脂多糖(LPS)4mg/kg〔溶于30μL磷酸盐缓冲液(PBS)中〕诱导ALI小鼠模型,对照组经气管内滴注30μLPBS。各组于制模后24h处死小鼠,取肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF)。光镜下观察肺组织病理学改变;测定肺湿/干重(W/D)比值和BALF中蛋白含量;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织匀浆中IL-6、IL-10、IL-17A和TGF-β1水平;流式细胞仪检测肺组织中Treg和Th17细胞量;实时定量聚合酶链反应(PCR)检测肺组织维甲酸相关孤核受体γt(ROR-γt)、TGF-β1、叉头蛋白P3(Foxp3)、Smad2、Smad3、Smad7的mRNA表达;蛋白质免疫印迹试验(WesternBlot)检测肺组织磷酸化Smad2/3、Smad7(p-Smad2/3、p-Smad7)表达。结果与对照组比较,ALI模型组肺组织可见大量炎性细胞浸润,伴有肺泡壁间隔增厚、充血水肿/塌陷和点状出血;肺W/D比值、BALF中蛋白含量及肺
作者:孙宏;刘显东;吕迪宇;包晓玮;白建文;唐伦先
来源:中华危重病急救医学 2016 年 28卷 11期