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目的:探讨虫草素对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾小管上皮细胞损伤的保护作用及机制。方法:取大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E,以1×10 5/mL接种于细胞培养板,并将传至第3代的细胞分为正常对照组(Ctrl组)、LPS组(1 mg/L的LPS刺激细胞)、10 μmol/L和20 μmol/L虫草素干预组(LPS+C 10组、LPS+C 20组)。采用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞活性;2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色法检测细胞内活性氧(ROS)水平;用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测炎症相关因子细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)以及核转录因子-κB(NF-κB)的蛋白表达。 结果:与Ctrl组比较,LPS可明显抑制NRK-52E细胞活性,增加细胞内ROS含量,上调ICAM-1、VCAM-1、IL-1β以及NF-κB的蛋白表达。与LPS组比较,经10 μmol/L或20 μmol/L虫草素处理后,NRK-52E细胞活性明显升高(以Ctrl组为1:0.717±0.017、0.916±0.036比0.554±0.046),细胞内ROS水平明显降低(以Ctrl组为1:1.527±0.165、1.098±0.168比2.543±0.127),同时ICAM-1、VCAM-1、IL-1β及NF-κB的蛋白表达均明显下调〔以Ctrl组为1:ICAM-1/GAPDH为2.364±0.097、1

作者:杨永丽;项辉;肖志英

来源:中华危重病急救医学 2021 年 33卷 2期

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作者:
杨永丽;项辉;肖志英
来源:
中华危重病急救医学 2021 年 33卷 2期
标签:
虫草素 脂多糖 肾小管上皮细胞 核转录因子-κB Cordycepin Lipopolysaccharide Renal proximal tubular cell Nuclear factor-κB
目的:探讨虫草素对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾小管上皮细胞损伤的保护作用及机制。方法:取大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E,以1×10 5/mL接种于细胞培养板,并将传至第3代的细胞分为正常对照组(Ctrl组)、LPS组(1 mg/L的LPS刺激细胞)、10 μmol/L和20 μmol/L虫草素干预组(LPS+C 10组、LPS+C 20组)。采用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞活性;2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色法检测细胞内活性氧(ROS)水平;用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测炎症相关因子细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)以及核转录因子-κB(NF-κB)的蛋白表达。 结果:与Ctrl组比较,LPS可明显抑制NRK-52E细胞活性,增加细胞内ROS含量,上调ICAM-1、VCAM-1、IL-1β以及NF-κB的蛋白表达。与LPS组比较,经10 μmol/L或20 μmol/L虫草素处理后,NRK-52E细胞活性明显升高(以Ctrl组为1:0.717±0.017、0.916±0.036比0.554±0.046),细胞内ROS水平明显降低(以Ctrl组为1:1.527±0.165、1.098±0.168比2.543±0.127),同时ICAM-1、VCAM-1、IL-1β及NF-κB的蛋白表达均明显下调〔以Ctrl组为1:ICAM-1/GAPDH为2.364±0.097、1