目的:探讨Tim-3与肝癌细胞发生上皮间质转化(EMT)的关系及对肝癌细胞侵袭和转移能力的影响.方法:培养正常肝细胞LO2和肝癌细胞SMMC-7721,RT-PCR检测Tim-3表达差异,将SMMC-7721分为3组,对照组:未接受转染的SMMC-7721;实验组:转染Tim-3 siRNA,细胞低表达Tim-3;阳性对照组:转染PEX-3-hTim-3过表达质粒,细胞高表达Tim-3.应用RT-PCR、Westernblot检测3组肝癌细胞Tim-3及EMT相关基因:E-cadherin、N-cadherin、MMP-9、Twist1、Slug、Snail、Smad mRNA和蛋白的表达.通过Transwell小室侵袭实验检测3组肝癌细胞迁移和侵袭能力改变;分析Tim-3表达与EMT相关基因表达的相关性.结果:(1)与正常肝细胞LO2比较,Tim-3在肝癌细胞中高表达(P＜O.05);(2)RT-PCR和Western bolt结果提示,实验组上皮标志物E-cadherin表达较对照组明显上升(P＜0.05),而间质标志物N-cadherin、MMP-9、Twist1、Snail、Slug、Smad表达较对照组下降(P＜0.05),提示EMT受到抑制;阳性对照组中E-cadhenn表达较对照组下降(P＜0.05),N-cadherin、MMP-9、Twist1、Snail、Slug、Smad表达较对照组上升(P＜0.05),促进了肝癌EMT;(3)Transwell迁移实验中,实验组与对照组和阳性对照组相比较,肝癌细胞迁移和侵袭细胞数明显减少,3组之间比较差异均有统计学意义(P＜0.05

作者：林华鹏；段艳飞；马长林；乔森

来源：中国现代普通外科进展 2019 年 22卷 9期