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目的:探讨甲氨喋吟、三磷酸腺苷诱导髓性白血病细胞系U937细胞凋亡过程中P73mRNA的表达变化,以进一步了解P73基因在U937细胞凋亡中的作用.方法:用上述药物诱导U937细胞凋亡,凋亡指标采用细胞形态学、DNA片段电泳、流式细胞术检测DNA含量等方法;采用半定量逆转录PCR(RT-PCR)检测P73mRNA的表达变化.结果:甲氨蝶呤、三磷酸腺苷均可诱导U937细胞凋亡.5μmol/L的甲氨蝶呤和0.25g/L的三磷酸腺苷分别作用于U937细胞6h、24h,光镜下见细胞明显聚集、体积缩小,Wright's+Giemsa染色见染色质明显浓缩、核碎裂等现象,而对照组未出现上述现象;DNA片断电泳见清晰的梯形条带;流式细胞仪检测:5μmol/L的甲氨蝶呤作用于U937细胞6h、8h、10h,细胞的凋亡率分别为:5.15

作者:卢青;肖广芬;陈艳华

来源:中国现代医学杂志 2002 年 12卷 21期

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作者:
卢青;肖广芬;陈艳华
来源:
中国现代医学杂志 2002 年 12卷 21期
标签:
P73 细胞凋亡 U937细胞
目的:探讨甲氨喋吟、三磷酸腺苷诱导髓性白血病细胞系U937细胞凋亡过程中P73mRNA的表达变化,以进一步了解P73基因在U937细胞凋亡中的作用.方法:用上述药物诱导U937细胞凋亡,凋亡指标采用细胞形态学、DNA片段电泳、流式细胞术检测DNA含量等方法;采用半定量逆转录PCR(RT-PCR)检测P73mRNA的表达变化.结果:甲氨蝶呤、三磷酸腺苷均可诱导U937细胞凋亡.5μmol/L的甲氨蝶呤和0.25g/L的三磷酸腺苷分别作用于U937细胞6h、24h,光镜下见细胞明显聚集、体积缩小,Wright's+Giemsa染色见染色质明显浓缩、核碎裂等现象,而对照组未出现上述现象;DNA片断电泳见清晰的梯形条带;流式细胞仪检测:5μmol/L的甲氨蝶呤作用于U937细胞6h、8h、10h,细胞的凋亡率分别为:5.15