用硫氧还蛋白融合表达系统表达小鼠内皮抑素-临床诊疗知识库

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作者：

马卫列；刘芳；何承伟

来源：

中国现代医学杂志 2006 年 16卷 9期

标签：

内皮抑素硫氧还蛋白融合表达系统融合蛋白

目的利用硫氧还蛋白融合表达系统表达小鼠内皮抑素(endostatin).方法采用PCR技术从pMFGendo质粒上扩增出小鼠endostatin完整的cDNA序列,将其克隆至硫氧还蛋白融合表达载体pThiohisA中,转化大肠杆菌BL21,经IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导表达重组融合蛋白,SDS-PAGE分析表达产物为包涵体,将包涵体纯化后通过镍柱亲和层析得到纯化的、可溶性的小鼠内皮抑素,经SDS-PAGE分析鉴定.结果高效表达出相对分子量约32KD的重组融合蛋白,灰度扫描软件分析显示,其表达量占菌体总蛋白质的35.9

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