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目的 以A10、THP-1及ECV304 3种细胞为研究对象,观察氧化型低密度脂蛋白对3种细胞PKC活性的影响.方法 用0,10,20,40和80μg/mL oxLDL共孵育24 h,PepTag(r)非射性蛋白激酶检测法对荷脂细胞胞膜中PKC活性进行定性定量检测-琼脂糖凝胶电泳分离磷酸化条带,观察活性变化的趋势,紫外/可见分光光度计检测570nm吸光度,定量酶的绝对活性.结果 随着oxLDL浓度的增加,A10细胞膜PKC活性从静息状态的(0.2613±0.0521)units/mL陡增至(0.7685±0.0869)units/mL;THP-1巨噬细胞由(0.0670±0.0091)units/mL增至(0.1357±0.0235)unim/mL:ECV304内皮细胞由(0.0550±0.0075)units/mL增至(0.1216±0.0187)units/mL,其中平滑肌细胞膜活性增幅最大.结论 oxLDL浓度依赖性的增强平滑肌细胞、巨噬细胞和内皮细胞的蛋白激酶C活性.

作者:王中群;唐湘宇;黄谙非;杨永宗;王佐;赵卫星;杨晓煜;李丽华;袁中华

来源:中国现代医学杂志 2008 年 18卷 13期

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作者:
王中群;唐湘宇;黄谙非;杨永宗;王佐;赵卫星;杨晓煜;李丽华;袁中华
来源:
中国现代医学杂志 2008 年 18卷 13期
标签:
氧化低密度脂蛋白 蛋白激酶C 酶活性 动脉粥样硬化
目的 以A10、THP-1及ECV304 3种细胞为研究对象,观察氧化型低密度脂蛋白对3种细胞PKC活性的影响.方法 用0,10,20,40和80μg/mL oxLDL共孵育24 h,PepTag(r)非射性蛋白激酶检测法对荷脂细胞胞膜中PKC活性进行定性定量检测-琼脂糖凝胶电泳分离磷酸化条带,观察活性变化的趋势,紫外/可见分光光度计检测570nm吸光度,定量酶的绝对活性.结果 随着oxLDL浓度的增加,A10细胞膜PKC活性从静息状态的(0.2613±0.0521)units/mL陡增至(0.7685±0.0869)units/mL;THP-1巨噬细胞由(0.0670±0.0091)units/mL增至(0.1357±0.0235)unim/mL:ECV304内皮细胞由(0.0550±0.0075)units/mL增至(0.1216±0.0187)units/mL,其中平滑肌细胞膜活性增幅最大.结论 oxLDL浓度依赖性的增强平滑肌细胞、巨噬细胞和内皮细胞的蛋白激酶C活性.