目的 构建pTRE-Tight-Ang-1可调控性真核表达载体,并检测其在心脏细胞中表达的可调控性.方法 巢式多聚酶链反应(nested PCR)从肺组织扩增Ang-1,测序正确后将其亚克隆入pTRE-Tight载体中,采用脂质体将pTet-on-Advanced质粒和pTRE-Tight-Ang-1共转染入新生sD大鼠心肌细胞,以不同浓度强力霉素(Dox)诱导,Westem blot检测Ang-1蛋白表达水平.结果 通过巢式PCR获得了Ang-1全长cDNA,与Genebank比对,序列完全一致.Western blot检测表明,所构建的pTRE-Tight-Ang-1可调控性表达载体能在心肌细胞内表达,表达量呈浓度依赖性.结论 该实验成功构建pTKE-Tight-Ang-1真核表达载体,在心肌细胞中的表达受DOX的调控.
作者：张昊；董红燕；张中明
来源：中国现代医学杂志 2008 年 18卷 13期
