目的 探讨VEGF启动子驱动的双自杀基因体系对人乳腺癌细胞MCF-7靶向治疗作用以及该体系能否诱导体内外MCF-7细胞的凋亡.方法 选择表达VEGF的MCF-7细胞和不表达VEGF的原代培养的乳腺上皮细胞,用重组腺病毒Ad-VEGFP-CD/TK感染之,荧光显微镜观察其感染效率.RT-PCR方法检测受感染细胞目的 基因的表达,给予前药GCV和5-FC后于倒置显微镜观察.采用流式细胞仪检测细胞内DNA含量的变化.建立荷人乳腺癌的裸鼠动物模型,观察各治疗组的治疗效果,应用透射电镜观察移植瘤细胞超微结构.结果 携带双自杀基因和报告基因(GFP)的重组腺病毒载体,感染复数为100时,95％以上的受感染MCF-7和乳腺上皮细胞中有GFP表达.RT-PCR检测发现MCF-7细胞有目的 基因的表达,而乳腺上皮细胞无表达.倒置显微镜下观察用药组细胞出现凋亡征象;用流式细胞仪测定用药组出现典型的凋亡峰.在MCF-7裸鼠移植瘤模型中,治疗组裸鼠移植瘤的生长明显受到抑制,其余各组肿瘤生长情况无明显差别;在透射电镜下可见治疗组多量的凋亡细胞.结论 体内外实验均表明VEGF启动子可调控双自杀基因体系靶向性诱导人乳腺癌细胞MCF-7细胞凋亡.
作者：KONG Heng；黄宗海；YU Jin-long；厉周；LI Qiang
来源：中国现代医学杂志 2008 年 18卷 14期
