目的:研究MicroRNA-219-5p(miR-219-5p)靶向E-钙黏蛋白(E- Cadherin)调控上皮间质转化(EMT)抑制肝癌细胞侵袭转移的分子机制。方法首先通过生物信息学方法,寻找与E- Cadherin结合特异性最好、稳定性强的miRNAs。在30例肝癌组织和20例癌旁肝组织中,通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测E- Cadherin的表达水平;实时荧光定量PCR检测(qRT- PCR)miR-219-5p表达,分析两者之间的相关性。在高转移和低转移的肝癌细胞株中,qRT- PCR检测miR-219-5p表达,Western blot检测E- Cadherin、N- cad-herin表达。采用Lipofectamine 2000将miR-219-5p 模拟子(mimic)、抑制子(inhibitor)、阴性对照组(negative contral)转染到肝癌 HepG2细胞系,qRT- PCR 检测 miR-219-5p 表达,Western blot 检测 E- Cadherin、N- cadherin的表达;Transwell方法检测miR-219-5p表达改变对肝癌细胞侵袭转移能力的影响。结果生物信息学发现miR-219-5p与E- Cadherin结合最稳定,且特异性最好。肝癌组织中miR-219-5p低表达、E- Cadherin高表达,而癌旁组织中miR-219-5p高表达、E- Cadherin低表达。高转移细胞株中miR-219-5p高表达、E- Cadherin低表达而N- cadherin高表达,在低转移细胞株中miR-219-5p低表达、E- Cadherin
作者:朱理辉;罗勇;廖文秋;张琍;李国庆
来源:中国现代医学杂志 2016 年 26卷 18期