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目的 研究miR-139-5p靶向转化生长因子(TGF)-β1调控上皮间质转化(EMT)相关信号通路抑制肝癌细胞侵袭转移的分子机制.方法 首先通过生物信息学方法,发现miR-139-5p是TGF-β1的最佳靶miRNA.在56例肝癌组织和20例癌旁组织中,通过免疫组化和蛋白印迹检测TGF-β1的表达水平;通过实时荧光定量(qRT)-PCR检测miR-139-5p表达,分析两者之间的相关性.在高转移和低转移的肝癌细胞株中,qRT-PCR检测miR-139-5p表达,蛋白印迹检测TGF-β1、N-cad-herin、Vimentin表达,分析miR-139-5p与上述三个蛋白之间的关系.在重组细胞株中,用qRT-PCR检测miR-139-5p的表达,蛋白印迹检测TGF-β1的表达,分析miR-139-5p表达是否与TGF-β1相关;Transwell方法检测miR-139-5p表达改变对肝癌重组细胞系侵袭能力的影响.结果 生物信息学发现有20个miRNAs可与TGF-β1结合.其中miR-139-5p是与TGF-β1结合最稳定,且特异性最好的首选靶miRNA.肝癌组织中TGF-β1表达阳性率为80.4% (45/56),癌旁正常肝组织中表达阳性率为15.0% (3/20),两者差异有显著性统计学意义(P<0.05).肝癌组织中miR-139-5p与TGF-β1的表达呈负相关.TGF-β1、N-cadherin、Vimentin三个蛋白的表达水平在不同转移细胞系中差异显著(P<0.05).转染miR-139-5p可下调肝癌细胞TGF-β1的

作者:王攀;谢敖文;范钦桥;吴新军;于毅;谭潭

来源:中华肝胆外科杂志 2016 年 22卷 1期

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作者:
王攀;谢敖文;范钦桥;吴新军;于毅;谭潭
来源:
中华肝胆外科杂志 2016 年 22卷 1期
标签:
miRNA 肝癌 侵袭转移 转化生长因子-β1 上皮间质转化信号通路 miRNA Hepatoma Invasion and metastasis Transforming growth factor-β1 Epithelial-mesenchymal transition signaling pathway
目的 研究miR-139-5p靶向转化生长因子(TGF)-β1调控上皮间质转化(EMT)相关信号通路抑制肝癌细胞侵袭转移的分子机制.方法 首先通过生物信息学方法,发现miR-139-5p是TGF-β1的最佳靶miRNA.在56例肝癌组织和20例癌旁组织中,通过免疫组化和蛋白印迹检测TGF-β1的表达水平;通过实时荧光定量(qRT)-PCR检测miR-139-5p表达,分析两者之间的相关性.在高转移和低转移的肝癌细胞株中,qRT-PCR检测miR-139-5p表达,蛋白印迹检测TGF-β1、N-cad-herin、Vimentin表达,分析miR-139-5p与上述三个蛋白之间的关系.在重组细胞株中,用qRT-PCR检测miR-139-5p的表达,蛋白印迹检测TGF-β1的表达,分析miR-139-5p表达是否与TGF-β1相关;Transwell方法检测miR-139-5p表达改变对肝癌重组细胞系侵袭能力的影响.结果 生物信息学发现有20个miRNAs可与TGF-β1结合.其中miR-139-5p是与TGF-β1结合最稳定,且特异性最好的首选靶miRNA.肝癌组织中TGF-β1表达阳性率为80.4% (45/56),癌旁正常肝组织中表达阳性率为15.0% (3/20),两者差异有显著性统计学意义(P<0.05).肝癌组织中miR-139-5p与TGF-β1的表达呈负相关.TGF-β1、N-cadherin、Vimentin三个蛋白的表达水平在不同转移细胞系中差异显著(P<0.05).转染miR-139-5p可下调肝癌细胞TGF-β1的