目的:研究干扰瞬时受体电位通道7(TRPM7)对人肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的影响。方法用转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激人胚肺成纤维细胞WI-38和MRC-5,Western blot检测细胞平滑肌肌动蛋白(α- SMA)和胶原Ⅰ的表达,来评价细胞的转化。用实时聚合酶链反应(Real- time PCR)和Western blot检测细胞中TRPM7的表达。将特异性的TRPM7 siRNA转染到细胞中,并将细胞分为对照组、模型组、TRPM7 siRNA组、转染非特异性siRNA组(Scramble组)。检测转化过程中相关蛋白α- SMA、胶原Ⅰ、Smad3、p- Smad3及Smad7的表达。结果 TGF-β1(15μg/L)作用24 h后,成功诱导肺成纤维细胞转化为肌成纤维细胞。与对照组比较,模型组细胞中TRPM7 mRNA和蛋白高表达,且细胞中α- SMA、胶原Ⅰ、Smad3及p- Smad3的蛋白表达增多,Smad7表达降低,差异有统计学意义(<0.05)。与模型组比较,TRPM7 siRNA转染组细胞TRPM7 mRNA和蛋白低表达,且α- SMA、胶原Ⅰ、Smad3及p- Smad3的表达下降,Smad7的表达升高,差异有统计学意义(<0.05)。结论下调TRPM7可在一定程度上干预肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化,该作用可能与TGF-β1/Smads信号通路有关。
作者:李利华;卢滨;吴红科;张浩;姚菲菲
来源:中国现代医学杂志 2017 年 27卷 1期