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目的 探讨核转录因子κBp65(NF-κBp65)沉默对鼻咽癌的生物学作用.方法 构建NF-κBp65特异性小干扰核糖核酸(siRNA)质粒表达载体(pGPU6/RFP/Neo-NF-κBp65)和阴性对照质粒表达载体(pG-PU6/RFP/Neo-NC).采用非脂质体脂类转染剂将重组质粒表达载体转入人鼻咽癌CNE2细胞,建立NF-κBp65沉默的稳定转染CNE2细胞株(NF-κBp65沉默组)和阴性对照细胞株(阴性对照组);蛋白质印迹法(Western blot)分析癌细胞中NF-κBp65基因的表达水平,MTT实验及流式细胞术分析癌细胞的增殖能力和细胞周期变化;复制裸鼠移植瘤模型,分析沉默NF-κBp65对癌细胞成瘤性的影响.结果 成功获得稳定转染CNE2细胞株,NF-κBp65沉默组细胞中NF-κBp65蛋白表达水平降低;NF-κBp65沉默后,CNE2细胞周期阻滞于S期,增殖速度减慢;NF-κBp65沉默组裸鼠移植瘤生长慢,重量轻,与阴性对照组和空白对照组比较,差异有统计学意义(=14.386,<0.05).结论 NF-κBp65沉默能降低鼻咽癌CNE2细胞的恶性生物学行为.

作者:范才文;唐娟;黄辉;李璐;罗琴;易世江;向秋

来源:中国现代医学杂志 2017 年 27卷 8期

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作者:
范才文;唐娟;黄辉;李璐;罗琴;易世江;向秋
来源:
中国现代医学杂志 2017 年 27卷 8期
标签:
鼻咽癌 核转录因子-κBp65 小干扰核糖核酸 nasopharyngeal carcinoma NF-κB p65 siRNA
目的 探讨核转录因子κBp65(NF-κBp65)沉默对鼻咽癌的生物学作用.方法 构建NF-κBp65特异性小干扰核糖核酸(siRNA)质粒表达载体(pGPU6/RFP/Neo-NF-κBp65)和阴性对照质粒表达载体(pG-PU6/RFP/Neo-NC).采用非脂质体脂类转染剂将重组质粒表达载体转入人鼻咽癌CNE2细胞,建立NF-κBp65沉默的稳定转染CNE2细胞株(NF-κBp65沉默组)和阴性对照细胞株(阴性对照组);蛋白质印迹法(Western blot)分析癌细胞中NF-κBp65基因的表达水平,MTT实验及流式细胞术分析癌细胞的增殖能力和细胞周期变化;复制裸鼠移植瘤模型,分析沉默NF-κBp65对癌细胞成瘤性的影响.结果 成功获得稳定转染CNE2细胞株,NF-κBp65沉默组细胞中NF-κBp65蛋白表达水平降低;NF-κBp65沉默后,CNE2细胞周期阻滞于S期,增殖速度减慢;NF-κBp65沉默组裸鼠移植瘤生长慢,重量轻,与阴性对照组和空白对照组比较,差异有统计学意义(=14.386,<0.05).结论 NF-κBp65沉默能降低鼻咽癌CNE2细胞的恶性生物学行为.