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目的 观察二氢杨梅素(DMY)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响,并探讨自噬在其中的作用.方法 DMY(0.01、0.10、1.00和10.00μmol/L)预处理HUVECs 2 h,用100.0 mg/L ox-LDL继续培养细胞24 h.以辛伐他汀作为阳性对照组.采用噻唑蓝法检测细胞活力,Hoechst 33258染色观察细胞核形态,透射电镜观察自噬体,Western blot检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1和p62/SQSTM1的表达,观察自噬抑制剂对DMY作用的影响.结果 与对照组比较,ox-LDL组细胞的存活率降低(<0.05),细胞核呈集中高强度蓝色荧光,固缩致密浓染或碎块状致密浓染,颜色发白,细胞核较小,形态不规则,自噬体和自噬溶酶体数量增加;Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值上调,而p62的表达下调(<0.05).与ox-LDL组比较,0.1、1.0和10.0μmol/L DMY预处理组细胞存活率均升高;细胞核荧光强度降低,核固缩致密浓染和碎块状致密浓染减少,形态较规则;1.0μmol/L DMY预处理组的自噬体和自噬溶酶体数量增加;Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值上调,而p62的表达下调(<0.05).自噬抑制剂3-MA部分抵消DMY抑制ox-LDL诱导的HUVECs存活率降低(<0.05).结论 DMY能抑制ox-LDL诱导的HUVECs损伤,其机制与诱导自噬有关.

作者:钟惠娟;陈璐;廖慧颖;张涛;王波;周洁

来源:中国现代医学杂志 2017 年 27卷 23期

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作者:
钟惠娟;陈璐;廖慧颖;张涛;王波;周洁
来源:
中国现代医学杂志 2017 年 27卷 23期
标签:
二氢杨梅素 氧化低密度脂蛋白 内皮细胞 自噬 自噬相关蛋白 Dihydromyricetin oxidized low-density lipoprotein endothelial cell autophagy autophagy related proteins
目的 观察二氢杨梅素(DMY)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响,并探讨自噬在其中的作用.方法 DMY(0.01、0.10、1.00和10.00μmol/L)预处理HUVECs 2 h,用100.0 mg/L ox-LDL继续培养细胞24 h.以辛伐他汀作为阳性对照组.采用噻唑蓝法检测细胞活力,Hoechst 33258染色观察细胞核形态,透射电镜观察自噬体,Western blot检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1和p62/SQSTM1的表达,观察自噬抑制剂对DMY作用的影响.结果 与对照组比较,ox-LDL组细胞的存活率降低(<0.05),细胞核呈集中高强度蓝色荧光,固缩致密浓染或碎块状致密浓染,颜色发白,细胞核较小,形态不规则,自噬体和自噬溶酶体数量增加;Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值上调,而p62的表达下调(<0.05).与ox-LDL组比较,0.1、1.0和10.0μmol/L DMY预处理组细胞存活率均升高;细胞核荧光强度降低,核固缩致密浓染和碎块状致密浓染减少,形态较规则;1.0μmol/L DMY预处理组的自噬体和自噬溶酶体数量增加;Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值上调,而p62的表达下调(<0.05).自噬抑制剂3-MA部分抵消DMY抑制ox-LDL诱导的HUVECs存活率降低(<0.05).结论 DMY能抑制ox-LDL诱导的HUVECs损伤,其机制与诱导自噬有关.