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目的 分析改良的qPCR与水痘-带状疱疹病毒(VZV)DNA试剂盒检测VZV DNA的检出率,并进一步探讨其临床应用.方法 选取2017年5月—2017年7月在西南医科大学附属医院就诊的带状疱疹患者31例.利用患者疱液提取标准品,并根据VZV DNA保守序列ORF59制备引物以设计一种改良的qPCR.对比该方法与试剂盒检测VZV DNA的效果后,用该方法测定伐昔洛韦抗病毒治疗前后外周血单个核细胞(PBMC)和血浆VZV DNA的阳性率.结果 患者疱液提取的标准品大小为395 bp.经测序并与VZV DNA进行比对,标准品被匹配上的碱基数占比99%.该qPCR的标准曲线决定系数R2=0.9999,回归方程Y=-3.9367X+45.07,其中X为Log值,Y为Ct值.改良的qPCR与VZV DNA试剂盒检测PBMC中VZV DNA阳性率均为73.3%.治疗前后PBMC与血浆的VZV DNA阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05).PBMC和血浆在治疗前与治疗后的VZV DNA阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 改良的qPCR与VZV DNA试剂盒的检测效果相近,且血浆可替代PBMC作为检测标本.该方法具有经济、快捷的优势,值得临床推广应用.

作者:钟婷婷;任虎;席瑞阑;许飏

来源:中国现代医学杂志 2020 年 30卷 24期

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作者:
钟婷婷;任虎;席瑞阑;许飏
来源:
中国现代医学杂志 2020 年 30卷 24期
标签:
水痘 疱疹,带状 水痘-带状疱疹病毒 标本 血浆
目的 分析改良的qPCR与水痘-带状疱疹病毒(VZV)DNA试剂盒检测VZV DNA的检出率,并进一步探讨其临床应用.方法 选取2017年5月—2017年7月在西南医科大学附属医院就诊的带状疱疹患者31例.利用患者疱液提取标准品,并根据VZV DNA保守序列ORF59制备引物以设计一种改良的qPCR.对比该方法与试剂盒检测VZV DNA的效果后,用该方法测定伐昔洛韦抗病毒治疗前后外周血单个核细胞(PBMC)和血浆VZV DNA的阳性率.结果 患者疱液提取的标准品大小为395 bp.经测序并与VZV DNA进行比对,标准品被匹配上的碱基数占比99%.该qPCR的标准曲线决定系数R2=0.9999,回归方程Y=-3.9367X+45.07,其中X为Log值,Y为Ct值.改良的qPCR与VZV DNA试剂盒检测PBMC中VZV DNA阳性率均为73.3%.治疗前后PBMC与血浆的VZV DNA阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05).PBMC和血浆在治疗前与治疗后的VZV DNA阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 改良的qPCR与VZV DNA试剂盒的检测效果相近,且血浆可替代PBMC作为检测标本.该方法具有经济、快捷的优势,值得临床推广应用.