目的 基于骨保护蛋白(OPG)/细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/细胞核因子κB受体活化因子(RANK)通路探究Lnc-AK077216对破骨细胞(OC)分化成熟的调控作用.方法 取对数生长期RAW264.7小鼠单核巨噬细胞,采用脂质体转染法将Lnc-AK077216-shRNA、Control-shRNA转染至RAW264.7细胞,分别设为转染组、空载组.另取未作处理细胞设为对照组.采用荧光显微镜观察转染率,并采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定转染后Lnc-AK077216 mRNA相对表达量;抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测诱导分化7 d后的OC数及阳性染色面积;采用qRT-PCR检测诱导分化培养3 d后各组OPG、RANKL、RANK mRNA相对表达量;采用Western blotting检测诱导分化培养3 d后各组OPG、RANKL、RANK蛋白相对表达量.结果 转染48 h后,荧光显微镜显示转染效率>70％;转染48 h后转染组Lnc-AK077216 mRNA相对表达量低于对照组和空载组(P<0.05);诱导分化前RAW264.7细胞多呈圆形且形态规则,诱导分化7 d后经TRAP染色,可观察到呈阳性的多核巨细胞,细胞有伪足、突起,且体积较大,表明生成OC;转染组OC数少于对照组和空载组(P<0.05),阳性染色面积小于对照组和空载组(P<0.05);转染组OPG mRNA和蛋白相对表达量高于对照组和空载组(P<0.05),RANKL、RANK mRNA和蛋白相对

作者：李坤；喻锋；余国庆；陈志龙；王晶

来源：中国现代医学杂志 2022 年 32卷 11期