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目的 对预测的日本血吸虫T细胞免疫反应表位进行合成与融合表达,并对其免疫原性进行分析.方法 根据3个表位(P7、P17、P18)的基因序列,人工合成正、负链寡核苷酸序列,使正链的5'端带有Nco I酶切位点,负链的3'端带有Xho I酶切位点.将每条表位肽的正、负寡核苷酸链退火形成双链DNA后,定向克隆入表达载体pET32c(+),电转化至 E.coli DH5α,经PCR、酶切及DNA序列分析鉴定出分别含有P7、P17、P18序列的重组质粒.提取重组质粒电转化至E.coli BL21(DE3)中,用异丙基硫代-β-D半乳糖苷对表位肽融合蛋白进行诱导表达,经12

作者:李健;殷旭仁;余传信;许永良;华万全;何伟;梁幼生;高琪

来源:中国血吸虫病防治杂志 2007 年 19卷 4期

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作者:
李健;殷旭仁;余传信;许永良;华万全;何伟;梁幼生;高琪
来源:
中国血吸虫病防治杂志 2007 年 19卷 4期
标签:
日本血吸虫 抗原表位 重组表达 淋巴细胞增殖试验
目的 对预测的日本血吸虫T细胞免疫反应表位进行合成与融合表达,并对其免疫原性进行分析.方法 根据3个表位(P7、P17、P18)的基因序列,人工合成正、负链寡核苷酸序列,使正链的5'端带有Nco I酶切位点,负链的3'端带有Xho I酶切位点.将每条表位肽的正、负寡核苷酸链退火形成双链DNA后,定向克隆入表达载体pET32c(+),电转化至 E.coli DH5α,经PCR、酶切及DNA序列分析鉴定出分别含有P7、P17、P18序列的重组质粒.提取重组质粒电转化至E.coli BL21(DE3)中,用异丙基硫代-β-D半乳糖苷对表位肽融合蛋白进行诱导表达,经12