设计了一种新的病原体蛋白质B细胞抗原表位的筛选和重组表达方法.不须使用抗原,而通过交替用病人血清IgG抗体"淘洗"(biopanning)随机肽库和用正常人血清18G反向吸附,来获得特异抗原表位资料.用HIV病人血清的IgG抗体淘洗噬菌体递呈随机十二肽库,再以正常人IgG抗体吸附,筛选到了能和HIV病人血清发生特异反应的噬菌体克隆,经ELISA、DNA测序等,成功地筛选出了位于HIVgp41外膜蛋白、高亲和力、构型特异的优势B细胞抗原表位(602GCSGKLICTTNV613).用大肠杆菌硫氧还蛋白作为骨架,在其活性部位以"内融合"形式重组表达了该抗原表位,纯化的重组蛋白具有良好的抗原性,能与HIV(+)IgG抗体及艾滋病人血清呈特异反应,表明本技术路线可以有效地进行HIV蛋白质的B细胞抗原表位筛选和重组表达.此方法也可移植于其它病原微生物抗原或自身抗原的表位研究,继而为基于抗原表位水平的特异诊断试剂的研制、疫苗的设计提供依据.
作者:杜勇;徐静;李敬云;侯利华;王海涛
来源:微生物学报 2000 年 40卷 3期