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目的 克隆和表达日本血吸虫天冬酰胺酰基内肽酶(Sj32),探索该重组抗原在动物血吸虫病诊断方面的应用潜能.方法 用PCR法从Sj32前体编码基因中克隆编码成熟体的基因片段,以pET-28(a)为表达载体,用大肠埃希菌表达,制备重组抗原(rSj32);应用ELISA方法检测待检血清,并比较rSj32、日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)以及重组诊断抗原rsj23对人工感染兔、小鼠及水牛血吸虫病的检测效果.结果 成功表达了Sj32成熟体,表达产物rSj32的分子量为41 kDa,可用His柱纯化,得率约为68.8 mg/L培养物.用rSj32检测人工感染兔、小鼠和水牛血清以及对照兔、小鼠和水牛血清,特异性分别为100.0

作者:孙帅;刘金明;宋震宇;王素娟;邢荣鹤;石耀军;李浩;陆珂;林矫矫

来源:中国血吸虫病防治杂志 2009 年 21卷 6期

知识库介绍

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作者:
孙帅;刘金明;宋震宇;王素娟;邢荣鹤;石耀军;李浩;陆珂;林矫矫
来源:
中国血吸虫病防治杂志 2009 年 21卷 6期
标签:
日本血吸虫 天冬酰胺酰基内肽酶 重组抗原 酶联免疫吸附试验 诊断 Schistosoma japonicum Asparaginyl endopeptidase Recombination antigen ELISA Diagnosis
目的 克隆和表达日本血吸虫天冬酰胺酰基内肽酶(Sj32),探索该重组抗原在动物血吸虫病诊断方面的应用潜能.方法 用PCR法从Sj32前体编码基因中克隆编码成熟体的基因片段,以pET-28(a)为表达载体,用大肠埃希菌表达,制备重组抗原(rSj32);应用ELISA方法检测待检血清,并比较rSj32、日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)以及重组诊断抗原rsj23对人工感染兔、小鼠及水牛血吸虫病的检测效果.结果 成功表达了Sj32成熟体,表达产物rSj32的分子量为41 kDa,可用His柱纯化,得率约为68.8 mg/L培养物.用rSj32检测人工感染兔、小鼠和水牛血清以及对照兔、小鼠和水牛血清,特异性分别为100.0