目的 克隆表达细粒棘球绦虫烯醇酶(EgEno)基因,并对其免疫诊断价值进行初步评价.方法 从细粒棘球绦虫cDNA中扩增目的基因,克隆入表达载体pET28a,转化E.coliBL21 (DE3),经异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,进行SDS-PAGE和免疫印迹法鉴定;采用细粒棘球蚴病及其他几种寄生虫病患者的血清和健康人血清,通过ELISA法评价重组EgEno抗原的免疫诊断效果.结果 重组质粒pET28a-EgEno构建成功.SDS-PAGE和免疫印迹法结果显示,重组蛋白在E.coliBL21 (DE3)中获得高效表达,重组蛋白EgEno相对分子量约为50 kDa,可被细粒棘球蚴病患者血清识别.EgEno对细粒棘球蚴病患者血清的免疫诊断敏感性为81.25%.结论 克隆出细粒棘球绦虫EgEno基因并在E.coliBL21(DE3)中表达,重组EgEno对细粒棘球蚴病有较好的免疫诊断价值.
作者:王莹;张璟;袁忠英;周何军;沈玉娟;徐馀信;王燕娟;伍卫平;曹建平
来源:中国血吸虫病防治杂志 2012 年 24卷 5期