目的 探讨赖氨酸甲基转移酶SET8(lysine methyltransferase SET8)介导损伤调节自噬基因(damage-regulated autophagy modulator 1,DRAM1)调控血管平滑肌细胞(vascular smooth mus-cle cells,VSMCs)凋亡的作用及机制.方法 体外原代培养VSMCs,采用脂质体转染法处理细胞,将细胞分为3组,正常组,SET8-NC组(转染对照NS-shRNA质粒),SET8-shRNA组(转染SET8-shRNA质粒).采用MTT比色法检测各组细胞增殖情况;原位末端标记法TUNEL染色检测细胞凋亡情况;Western blot检测各组细胞SET8、DRAM1、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcelllymphoma2,Bcl-2)、Bc1-2相关x蛋白(Bc1-2 assa-ciated X protein,Bax)的表达情况.为验证DRAM1对VSMCs凋亡的影响,转染DRAM1高表达,将细胞分为3组,正常组,DRAM1-NC组,DRAM1组.检测各组细胞增殖凋亡情况及DRAM1、Bax和Bcl-2的蛋白表达情况.结果 ①与正常组和SET8-NC组比较,MTT结果显示SET8-shRNA组细胞于12h、24h、36h、48h增殖降低(F=267.649,P<0.001;F=477.534,P<0.001;F=28.938,P=0.001;F=145.849,P<0.001),TUNEL染色结果显示SET8-shRNA组绿色荧光颗粒显著增多.Western blot结果显示,与正常组和SET8-NC组比较,SET8-shRNA组SET8、Bc1-2表达降低(F=34.247,P=0.001;F=39.218,P<0.001),DRAM1、Bax
作者:张东雪;刘兰;张胜雷;崔立文;冯青燕
来源:中国血液净化 2021 年 20卷 11期