目的:将抗栓肽34位的丙氨酸突变为色氨酸,构建活性较高的突变体.方法:通过设计合成两对引物经PCR获得抗栓肽突变体基因,利用质粒pET32a(+)作为载体,在大肠杆菌BL21(DE4)内表达.利用融合蛋白本身的组氨酸标签,以金属亲和色谱进行纯化,然后用肠激酶切除融合部分,所得蛋白用体外抗血小板凝集实验检测其活性.结果与结论:抗栓肽突变体以可溶形式高效表达,活性检测显示其抑制二磷酸腺苷诱导的血小板聚集的IC50为150 nmol/L.与原型蛋白相比,突变体活性明显提高.
作者：汤慧；劳兴珍；郑珩
来源：中国药科大学学报 2007 年 38卷 6期
