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目的 探讨白细胞介素17A(IL-17A)在肺炎链球菌急性中耳炎(AOM)黏膜免疫中的作用.方法 6~8周无特定病原体(SPF)级BALB/c小鼠,在感染前24h腹腔注射200 μg IL-17A抗体中和体内的IL-17A,注射相同剂量的Ig2a抗体作为对照组(Ig2a),经鼓膜途径注射肺炎链球菌,感染后第5天取中耳灌洗液,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测IL-17A、CXCL2和CXCL5的水平.取中耳听泡,乙二胺四乙酸(EDTA)脱钙,常规石蜡切片,苏木素-伊红(HE)染色,评估中耳炎的严重程度.新型肺炎链球菌PsaA蛋白疫苗经鼻腔途径免疫小鼠,末次免疫后2周取小鼠的脾脏,制成细胞悬液,PsaA抗原刺激72 h,ELISA检测培养上清液IL-17A的水平;末次免疫后2周经鼓膜途径注射肺炎链球菌,攻毒后5d取中耳灌洗液,ELISA检测IL-17A、CXCL2和CXCL5的水平.中耳攻毒后5d取中耳黏膜,抽提RNA,反转录cDNA,荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测IL-6、防御素β2和CXCL2 mRNA的表达水平.结果 在固有免疫中,中和体内的IL-17A,感染肺炎链球菌后,中耳有更严重的炎症反应,且中耳IL-17A、CXCL2和CXCL5分泌减少;在适应性免疫中,新型肺炎链球菌PsaA蛋白疫苗在CTB黏膜佐剂作用下经鼻腔途径免疫后,脾上清液分泌了较高水平的IL-17A,中耳攻毒后中耳黏膜灌洗液中检测到较高水平IL-17A,相关细胞因子CXCL2、CX

作者:徐江红;梁琼;刘向;李雯;戴文佳

来源:中国眼耳鼻喉科杂志 2017 年 17卷 5期

知识库介绍

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作者:
徐江红;梁琼;刘向;李雯;戴文佳
来源:
中国眼耳鼻喉科杂志 2017 年 17卷 5期
标签:
白细胞介素17A 黏膜免疫 急性中耳炎 肺炎链球菌 Interleukin-17A Mucosal immunity Acute otitis media Streptococcus pneumoniae
目的 探讨白细胞介素17A(IL-17A)在肺炎链球菌急性中耳炎(AOM)黏膜免疫中的作用.方法 6~8周无特定病原体(SPF)级BALB/c小鼠,在感染前24h腹腔注射200 μg IL-17A抗体中和体内的IL-17A,注射相同剂量的Ig2a抗体作为对照组(Ig2a),经鼓膜途径注射肺炎链球菌,感染后第5天取中耳灌洗液,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测IL-17A、CXCL2和CXCL5的水平.取中耳听泡,乙二胺四乙酸(EDTA)脱钙,常规石蜡切片,苏木素-伊红(HE)染色,评估中耳炎的严重程度.新型肺炎链球菌PsaA蛋白疫苗经鼻腔途径免疫小鼠,末次免疫后2周取小鼠的脾脏,制成细胞悬液,PsaA抗原刺激72 h,ELISA检测培养上清液IL-17A的水平;末次免疫后2周经鼓膜途径注射肺炎链球菌,攻毒后5d取中耳灌洗液,ELISA检测IL-17A、CXCL2和CXCL5的水平.中耳攻毒后5d取中耳黏膜,抽提RNA,反转录cDNA,荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测IL-6、防御素β2和CXCL2 mRNA的表达水平.结果 在固有免疫中,中和体内的IL-17A,感染肺炎链球菌后,中耳有更严重的炎症反应,且中耳IL-17A、CXCL2和CXCL5分泌减少;在适应性免疫中,新型肺炎链球菌PsaA蛋白疫苗在CTB黏膜佐剂作用下经鼻腔途径免疫后,脾上清液分泌了较高水平的IL-17A,中耳攻毒后中耳黏膜灌洗液中检测到较高水平IL-17A,相关细胞因子CXCL2、CX