目的:研究艾塞那肽改善缺氧复氧(H/R)条件下心肌H9c2细胞线粒体功能的机制.方法:体外培养H9c2细胞,分为空白对照组、药物对照(艾塞那肽200 nmol/L)组、模型(H/R)组、预处理(艾塞那肽200 nmol/L+H/R)组、胰高血糖素样肽1受体(GLP-1R)抑制剂[Exendin-(9-39)100 nmol/L+艾塞那肽200 nmol/L+H/R]组、环磷腺苷(cAMP)抑制剂(Rp-cAMPS 1μmol/L+艾塞那肽200 nmol/L+H/R)组和蛋白激酶A(PKA)抑制剂(H-895μmol/L+艾塞那肽200 nmol/L+H/R)组.除前2组外其余各组建立H/R模型,建模前30 min加入艾塞那肽,加入艾塞那肽前10 min加入相应的抑制剂.采用透射电镜观察线粒体形态结构,流式细胞术检测线粒体钙离子(Ca2+m)水平及线粒体膜电位(ΔΨm),酶标仪检测细胞三磷酸腺苷(ATP)水平.结果:与空白对照组比较,模型组细胞线粒体嵴肿胀增加,密度降低,呈空泡化;Ca2+m水平升高,ΔΨm和ATP水平降低(P<0.05).与模型组比较,预处理组细胞线粒体嵴肿胀减轻,密度增加,空泡化程度减轻;Ca2+m水平降低,ΔΨm和ATP水平升高(P<0.05).与预处理组比较,3种抑制剂组细胞Ca2+m水平升高,ΔΨm和ATP水平降低(P<0.05).结论:艾塞那肽可减轻H/R条件下H9c2细胞线粒体钙超载,升高ΔΨm,增加ATP生成.其机制可能与激活GLP-1R/cAMP/PKA信号通路有关.
作者:常广磊;刘剑;覃数;张冬颖
来源:中国药房 2016 年 27卷 10期