目的:研究二氢杨梅素(DMY)对高糖(HG)诱导的肾小球系膜细胞(MCs)的增殖及纤维连接蛋白(FN)堆积的影响,探讨其对糖尿病肾病肾小球硬化的作用机制.方法:将细胞分为正常组(5.5 mmol/L葡萄糖)、HG组(30 mmol/L葡萄糖)和DMY低、中、高浓度组(30 mmol/L葡萄糖+22.5、45、90μmol/L DMY),培养48 h后采用MTT法检测细胞的增殖活性[以光密度(OD)值反映];采用分子对接法对DMY与Smad2的结合状态进行模拟分析;将细胞分为正常组(5.5 mmol/L葡萄糖)、HG组(30 mmol/L葡萄糖)、DMY组(30 mmol/L葡萄糖+45μmol/L DMY)和DMY对照组(5.5 mmol/L葡萄糖+45μmol/L DMY),培养5 h后采用West-ern blot法检测细胞中磷酸化Smad2(p-Smad2)及细胞外基质蛋白FN的表达水平.结果:MTT检测结果显示,与正常组比较,HG组细胞的OD值显著升高(P<0.05);与HG组比较,DMY各浓度组细胞的OD值均显著降低(P<0.05).DMY与Smad2蛋白分子结合的吉布斯自由能(ΔG)为-5.64 kJ/mol,抑制常数Ki为73.53μmol/L,在第465、464、461、458这4个氨基酸残基位点有氢键供体与受体的结合.Western blot结果显示,与正常组比较,HG组细胞中p-Smad2及细胞外基质蛋白FN表达水平均显著升高(P<0.05);与HG组比较,DMY组细胞中p-Smad2及细胞外基质蛋白FN表达水平显著降低(P<0.05).结论
作者:李加林;郭小华;吴艳娇;黄志伟;刘思齐;吴素珍
来源:中国药房 2017 年 28卷 34期