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目的 探讨肿瘤相关糖类抗原Tn异常表达对人结肠癌细胞SW480的生物学行为的影响及可能的作用机制.方法 采用CRISPR/Cas9技术靶向敲除人结肠癌细胞SW480的T合酶基因以诱导Tn抗原异常表达,应用流式细胞术鉴定Tn抗原的表达情况;利用Transwell小室法检测Tn抗原表达对SW480细胞迁移和侵袭能力的影响;最后采用蛋白质印迹法检测Tn异常表达对细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白的影响.结果 蛋白质印迹法结果显示CRISPR/Cas9成功敲除了SW480细胞的T合酶基因,并导致Tn抗原异常表达.Tn抗原表达明显促进SW480细胞的迁移和侵袭能力.此外,Tn抗原表达显著激活了EMT信号通路,表现为上皮相关蛋白E-钙黏蛋白表达水平下调和间质相关蛋白N-钙黏蛋白和波形蛋白表达水平上调.结论 肿瘤相关糖类抗原Tn异常表达可促进结肠癌细胞的迁移和侵袭,其机制可能激活EMT信号通路有关.

作者:董希琛;汉京华;李丽娜;王雅昆;温韬

来源:中国医刊 2020 年 55卷 2期

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作者:
董希琛;汉京华;李丽娜;王雅昆;温韬
来源:
中国医刊 2020 年 55卷 2期
标签:
结肠癌 T合酶 Tn抗原 上皮-间质转化
目的 探讨肿瘤相关糖类抗原Tn异常表达对人结肠癌细胞SW480的生物学行为的影响及可能的作用机制.方法 采用CRISPR/Cas9技术靶向敲除人结肠癌细胞SW480的T合酶基因以诱导Tn抗原异常表达,应用流式细胞术鉴定Tn抗原的表达情况;利用Transwell小室法检测Tn抗原表达对SW480细胞迁移和侵袭能力的影响;最后采用蛋白质印迹法检测Tn异常表达对细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白的影响.结果 蛋白质印迹法结果显示CRISPR/Cas9成功敲除了SW480细胞的T合酶基因,并导致Tn抗原异常表达.Tn抗原表达明显促进SW480细胞的迁移和侵袭能力.此外,Tn抗原表达显著激活了EMT信号通路,表现为上皮相关蛋白E-钙黏蛋白表达水平下调和间质相关蛋白N-钙黏蛋白和波形蛋白表达水平上调.结论 肿瘤相关糖类抗原Tn异常表达可促进结肠癌细胞的迁移和侵袭,其机制可能激活EMT信号通路有关.