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目的 检测地西他滨对A431细胞生物学功能的影响并初步探讨其机制.方法 将0、5、10和20 μmol/L的地西他滨分别作用于A431细胞,通过MTT法观察地西他滨对细胞增殖的影响,通过Western blotting和实时PCR检测地西他滨作用于A431细胞后细胞增殖相关蛋白Cyclin B1、PCNA和CDC2的改变.通过Hoeehst 33258染色检测0、5和10 μmol/L地西他滨对A431细胞凋亡状态的影响,采用Western blotting和实时PCR检测地西他滨对A431细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的影响.采用transwell实验检测细胞侵袭转移情况,并通过Western blotting和实时PCR检测0、5和10 μmol/L的地西他滨对侵袭转移相关蛋白MMP2的影响.结果 MTF检测发现,5、10和20 μmol/L的地西他滨作用于A431细胞24 h后对细胞增殖的抑制率分别为(43.81±1.53)%、(48.64±4.65)%和(50.69±4.99)%,随着药物的浓度增加,对A431细胞的增殖抑制率显著增加(P<0.05).Hoechst 33258染色发现,地西他滨可以显著促进细胞凋亡,transwell实验也证明地西他滨可以明显抑制A431细胞的转移能力.Western blotting和实时PCR结果显示,地西他滨影响A431细胞中Cyclin B1、CDC2、PCNA、Bax、Bcl-2和MMP2蛋白及mRNA水平,地西他滨处理组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 地西他滨对

作者:徐道知;欧阳玲

来源:中国医科大学学报 2017 年 46卷 12期

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作者:
徐道知;欧阳玲
来源:
中国医科大学学报 2017 年 46卷 12期
标签:
地西他滨 A431 增殖 凋亡 转移 decitabine A431 proliferation apoptosis metastasis
目的 检测地西他滨对A431细胞生物学功能的影响并初步探讨其机制.方法 将0、5、10和20 μmol/L的地西他滨分别作用于A431细胞,通过MTT法观察地西他滨对细胞增殖的影响,通过Western blotting和实时PCR检测地西他滨作用于A431细胞后细胞增殖相关蛋白Cyclin B1、PCNA和CDC2的改变.通过Hoeehst 33258染色检测0、5和10 μmol/L地西他滨对A431细胞凋亡状态的影响,采用Western blotting和实时PCR检测地西他滨对A431细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的影响.采用transwell实验检测细胞侵袭转移情况,并通过Western blotting和实时PCR检测0、5和10 μmol/L的地西他滨对侵袭转移相关蛋白MMP2的影响.结果 MTF检测发现,5、10和20 μmol/L的地西他滨作用于A431细胞24 h后对细胞增殖的抑制率分别为(43.81±1.53)%、(48.64±4.65)%和(50.69±4.99)%,随着药物的浓度增加,对A431细胞的增殖抑制率显著增加(P<0.05).Hoechst 33258染色发现,地西他滨可以显著促进细胞凋亡,transwell实验也证明地西他滨可以明显抑制A431细胞的转移能力.Western blotting和实时PCR结果显示,地西他滨影响A431细胞中Cyclin B1、CDC2、PCNA、Bax、Bcl-2和MMP2蛋白及mRNA水平,地西他滨处理组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 地西他滨对