目的人TRAIL基因胞外区片段(114-281氨基酸残基,sTRAIL)的克隆、表达、纯化及对人肺腺癌A549细胞的抗肿瘤活性研究.方法采用PCR技术从人胎盘和肺cDNA文库中扩增出全长人TRAIL基因,克隆到pUC19质粒载体上进行测序.然后再采用PCR技术,以全长人TRAIL基因为模板,扩增出sTRAIL基因片段并定向克隆到pET-11a表达载体中,转化大肠杆菌BL21进行表达.表达后的产物经变性、复性和分离纯化,纯化后的sTRAIL用结晶紫染色法和流式细胞仪法测定其对人肺癌细胞A549的细胞毒性作用.结果从人胎盘和肺cDNA文库中都能扩增出全长人TRAIL 基因,经测序表明与已发表的人TRAIL基因序列一致.扩增出的人sTRAIL基因克隆到表达质粒载体pET-11a,经IPTG诱导表达,表达量占细菌全菌蛋白的50
作者：范清林；魏伟；邹文艺；宋礼华
来源：中国药理学通报 2006 年 22卷 2期
