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目的 探讨RhoA是否介导缓激肽开放血肿瘤屏障.方法 应用RhoA的特异性抑制剂C3胞外酶(C3 exoenzyme)预处理体外血肿瘤屏障模型的大鼠脑微血管内皮细胞后,测量跨内皮阻抗值(TEER),辣根过氧化物酶(HRP)渗漏量,分析血肿瘤屏障通透性的改变;Western blot法检测紧密连接相关蛋白claudin-5可溶性片段向不溶性片段的转变;免疫荧光法和细胞荧光标记法观察体外血肿瘤屏障模型的大鼠脑微血管内皮细胞紧密连接相关蛋白claudin-5和丝状肌动蛋白结构和分布的改变.结果 C3 exoenzyme抑制缓激肽诱导TEER值的降低,HRP流量升高;C3 exoenzyme抑制claudin-5可溶性片段向不溶性片段的转变;C3 exoenzyme抑制claudin-5由细胞膜向细胞质重新分布,抑制丝状肌动蛋白由细胞膜边缘向细胞中央区分布,分布于细胞边缘的F-actin明显增加,应力纤维形成明显减少.结论 RhoA介导缓激肽开放血肿瘤屏障.

作者:马腾;刘啸白;薛一雪

来源:中国药理学通报 2011 年 27卷 2期

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马腾;刘啸白;薛一雪
来源:
中国药理学通报 2011 年 27卷 2期
标签:
RhoA 缓激肽 血肿瘤屏障 紧密连接 claudin-5 肌动蛋白重排
目的 探讨RhoA是否介导缓激肽开放血肿瘤屏障.方法 应用RhoA的特异性抑制剂C3胞外酶(C3 exoenzyme)预处理体外血肿瘤屏障模型的大鼠脑微血管内皮细胞后,测量跨内皮阻抗值(TEER),辣根过氧化物酶(HRP)渗漏量,分析血肿瘤屏障通透性的改变;Western blot法检测紧密连接相关蛋白claudin-5可溶性片段向不溶性片段的转变;免疫荧光法和细胞荧光标记法观察体外血肿瘤屏障模型的大鼠脑微血管内皮细胞紧密连接相关蛋白claudin-5和丝状肌动蛋白结构和分布的改变.结果 C3 exoenzyme抑制缓激肽诱导TEER值的降低,HRP流量升高;C3 exoenzyme抑制claudin-5可溶性片段向不溶性片段的转变;C3 exoenzyme抑制claudin-5由细胞膜向细胞质重新分布,抑制丝状肌动蛋白由细胞膜边缘向细胞中央区分布,分布于细胞边缘的F-actin明显增加,应力纤维形成明显减少.结论 RhoA介导缓激肽开放血肿瘤屏障.