目的 研究龙牙楤木总皂苷(AS)对H2O2诱导乳鼠心肌细胞氧化损伤的保护作用.方法 分次消化法分离原代培养的乳鼠心肌细胞,建立H2O2诱导心肌细胞损伤模型;MTT法检测不同浓度AS对细胞保护作用的量效、时效关系;倒置显微镜下观察AS对细胞形态学和细胞搏动频率的影响;试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)的漏出量及丙二醛(MDA)含量,检测过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力.结果 不同浓度H2O2处理心肌细胞2 h,100~400 μmol·L-1对心肌细胞具有明显的损伤作用,呈剂量依赖性;LDH漏出量增加,MDA含量升高,SOD、CAT 、GSH-Px活力明显降低.而12.5~25 mg·L-1AS预处理8、12 h可明显地减轻损伤,有效保护心肌细胞.明显减少LDH的漏出,降低MDA含量,提高SOD、CAT 、GSH-Px活力;12.5~25 mg·L-1 AS于给药后4 h明显减慢心肌细胞的搏动频率,并呈剂量依赖性,表明在该剂量范围内AS具有明显的负性频率效应.结论 AS对H2O2致心肌细胞氧化损伤具有明显的保护作用,呈时间、剂量依赖性.其作用机制可能与其清除自由基,提高心肌细胞的抗氧酶活力有关;同时提示 AS的心肌保护作用可能与其减少心肌做功、降低心肌耗氧量、增加心肌细胞稳定性有关.
作者:孙桂波;王敏;高蒙蒙;徐惠波;孙晓波
来源:中国药理学通报 2013 年 29卷 6期